Muzeum mieści się w najstarszej krakowskiej zajezdni tramwaju konnego i elektrycznego, która powstawała etapami pod koniec XIX i w początkach XX wieku. Doskonale zachowany kompleks budynków przy ul. św. Wawrzyńca pozwala prześledzić rozwój komunikacji miejskiej w Krakowie od wprowadzenia tramwaju konnego w 1882 roku, poprzez tramwaj elektryczny, po autobusy, które pojawiły się w latach 20. XX wieku. W zabytkowej hali można podziwiać kilkanaście historycznych wagonów tramwajowych. Wszystkie są sprawne i w letnie niedziele obsługują specjalną Krakowską Linię Muzealną nr 0. Pozostałe stałe wystawy poświęcone są historii motoryzacji w Polsce, rozwojowi inżynierii miejskiej w Krakowie, dziejom krakowskiego drukarstwa od XV wieku, a przeznaczona dla dzieci i młodzieży interaktywna prezentacja zbudowana wokół koła pomaga uzmysłowić sobie związki różnych dziedzin nauki i życia. Muzeum organizuje także wystawy czasowe, warsztaty i wydarzenia popularyzujące wiedzę na temat nauki i techniki oraz prowadzi plenerowy Ogród Doświadczeń na terenie Parku Lotników Polskich.